鸡大肠杆菌多价灭活苗的研制及应用(2)

　　
　　对分离的3株地方菌株分别用中国兽药监察所提供的大肠杆菌“O”抗原定型血清进行分型。其中2株血清型分别是O2、O35，另1株未能分型。?
　　
　　2.2 菌株的致病力试验?
　　
　　分离菌株的24 h肉汤培养物攻毒后24 h～48 h，接种鸡发病并死亡，死亡率为100%。
　　
　　2.3 疫苗的安全性试验?　
　　
　　用自制灭活苗分别免疫24日龄和18周龄鸡各10只，每只鸡皮下注射2.5 mL，除有一过性精神沉郁外，没有发病和死亡。?
　　
　　2.4 疫苗的免疫保护试验?
　　
　　免疫组攻毒后没有异常表现，健康存活；对照组于攻毒后24 h~36 h发病，并陆续死亡。?
　　
　　2.5 田间试验?
　　
　　在铜川市及周边地区，对蛋鸡于12周龄，18周龄各皮下注射0.5 mL，先后免疫接种2.5万只蛋鸡，鸡群产蛋期月死淘率由1.5%~3%下降到0.5%?~0.8%，收到明显的效果。?
　　
　　3 讨论?
　　
　　3.1 用地方分离的鸡大肠杆菌强致病菌株与标准菌株制备的多价油乳剂灭活苗，预防鸡大肠杆菌病安全可靠，可减少药费开支，防止耐药菌株的产生。?
　　
　　3.2 用地方分离株加标准菌株制备的多价苗，免疫保护力强。单用地方分离株做疫苗，虽然适合当地的血清型，但交叉保护率较低。世界许多国家的调查发现，鸡致病性大肠杆菌的最常见血清型是O1、O2、O35和O78，有些菌株不能分型，用地方分离菌株与标准菌株制备的多价苗，交叉保护率高，效果稳定可靠。另外，大肠杆菌悬液经反复冻融震荡后，可使菌体的菌毛脱落，部分菌体裂解，充分暴露其抗原成分，增强免疫效果。?
　　
　　3.3 有的鸡大肠杆菌油乳剂灭活苗注射后，鸡只反应大，出现精神不好，减食等应激反应。但笔者制备的多价苗经安全试验和田间应用后观察，注苗的鸡饮食正常，笔者认为注苗后出现较大的反应，主要原因是大肠杆菌在培养过程中产生的毒素引起的。所以，菌悬液制备后应尽早灭活，防止其毒素的产生，是减少菌苗不良反应的关键。