蛋种鸡曲霉菌病的诊断(2)

2.3 分离培养结果 在沙保劳氏培养基（28℃）上生长非常迅速，培养10天菌落直径可达6～7 cm。分离菌株生长缓慢。菌落刚开始为白色，菌丝体紧密。随着分生孢子的形成，菌落逐渐变为黄色，稍微带有绿色，而菌落的边缘仍为白色。熟的菌落变为橄榄绿色，表面扁平并有放射状褶皱。菌核开始为白色菌丝体丛，后呈棕色或棕褐色，有些分离菌株的菌核比其分生孢子还明显。具有菌核的菌株，其菌落背面有的无色，有的为浅黄色，有的为棕色。霉菌的分生孢子顶囊呈放射状，分生孢子链断裂后呈疏松状。在卡贝克培养基上生长旺盛，开始时培养基为黄色，5天之后变成淡绿色，培养基变混浊，有大量的小颗粒状物质悬浮于培养基中。




图1 发病种鸡肝脏出现大量的含铁血黄素沉积，肝细胞索破坏，可见到菌丝体(×100〓H.E.染色)（略）


图2 发病种鸡肺脏中的霉菌菌体Ⅰ400 镀银染色）（略）

图3 发病种鸡肺脏中的霉菌菌体Ⅱ(×400 镀银染色）（略）


图4 （略）发病种鸡气管粘膜部分脱落，黏膜下层水肿，有炎性细胞浸润(×400〓H.E.染色) 镜检观察到分生孢子梗长约100 μm，直径10～65 μm，表面粗糙，分生孢子呈球形或近似球形小棘突状，呈链状排列，分生孢子柄壁厚而粗糙。顶囊呈球形或近似球形，顶囊大，的顶囊呈不规则形状，整个顶囊表面通常由两层小梗，也可见到单层小梗（图5、6）。

图5 分离培养霉菌Ⅰ(×100)（略）

图6 分离培养霉菌Ⅱ（略）



2.4 动物攻毒试验 10日龄雏鸡攻毒2天后，实验组死亡1只，临床表现呼吸困难，全身瘫痪。另有1只雏鸡精神不振，呼吸困难，不能直立，双腿弯曲，叫声清亮，全身打颤，眼睛不能睁开。其他实验组的雏鸡精神不振，步态拘谨，运动失调，饮水增加，食欲减退，生长缓慢，羽毛粗乱无光泽。对上述濒临死亡的雏鸡进行剖检发现，雏鸡气囊混浊，肺部有白色斑块状结节，肝脏上有白色的小点，十二指肠出血。30天后将存活的雏鸡全部进行剖检，攻毒组雏鸡肺部有大量渗出物出现，肠系膜有白色结节，气囊混浊，气管内有黏性物质，肝脏有白色结节，肠道有出血，部分肠系膜有白色结节。攻毒16只鸡均有类似病变，发病率为80%，其中4只有霉斑出现，占20%，共有6只雏鸡死亡，死亡率达30%。?



3 讨论?



3.1 病原确诊 根据流行病学调查、临床症状、真菌学鉴定及攻毒试验，证实造成本种鸡场顽固性呼吸困难而发病死亡的病原是真菌，特别是在肝脏和肺脏组织切片观察到真菌。镀银染色可以见到真菌菌丝和大体形态。在鉴定真菌过程中，分别用沙保劳氏和卡贝克培养基进行培养，通过观察真菌的形态和菌落的整体变化，可以确定本试验中病原可为黄曲霉菌。


攻毒试验也观察到，本次从20只临床病鸡分离出的病原使雏鸡出现相同的症状，可以初步证明造成鸡场发病的病原可为黄曲霉菌。?




3.2 流行原因的分析和防治对策 发病早期病变部位主要在肺脏，出现严重的呼吸困难，随着病程的发展，肾脏肿大，出现顽固性的腹泻症状。在晚期发现部分病鸡的腺胃乳头、肠道有出血症状和淋巴结节出现，怀疑病鸡在霉菌感染后机体抵抗力下降，产生免疫抑制，从而继发新城疫使病程变长。在培养过程中，还分离出大肠杆菌，同时在剖检中发现病鸡的气囊和肺部有大量的干酪样渗出物，所以可以确定感染霉菌后的病鸡继发了大肠杆菌病，从而也使病程加长。?


在真菌数量足以造成感染的情况下，由于存在环境因素、免疫抑制和营养不良等因素，可以暴发该病。感染霉菌后，家禽的抵抗力降低，可以继发大肠杆菌病、新城疫等其他疾病，从而使疾病的病程变长。?

曲霉菌对家禽特别是雏禽具有严重的危害性。Eggert和Barnhart曾报道了一个