鸡新城疫病毒(NDV)不同毒株的最特征的性质之一，是对鸡的致病性差别很大。根据在感染鸡所引起的临床症状可将NDV毒株分为5个群或病型，它们是：亲内脏的强毒力型，特点是高致病性，常常见到肠出血病变；亲神经的强毒力型，特点是有高的残废率，常有呼吸和神经症状；中等毒力型，特点是有呼吸症状，偶有神经症状，但残废率低；温和型或呼吸型，特点是症状温和或者亚临床型呼吸道感染；无症状的肠型，特点是常为亚临床型肠感染。
病型的划分很难界限分明，甚至在感染的无特定病原(SPF)鸡上也可以看到各型症状的重叠。此外，当与其他微生物混合感染或者当环境恶化时，温和毒株也可引起明显的临床症状。
由于鸡感染后的临床症状差别很大，不同宿主对感染的反应也不一样，这使诊断更为复杂。因此依据单一临床症状不能作为诊断ND的基础。若出现强毒力病型的有关症状和病变应怀疑本病。
●病原鉴定：
1.样品采集
从死禽采集的样品有口鼻拭子，还有肺、气囊、肠、脾、脑、肝和心组织，这些样品可单独或混合采集。
从活禽采集的样品应包括气管和泄殖腔拭子。在采集样品机会少的地方，除了受感染的或者有相关临床症状的器官和组织外，主要的应是泄殖腔拭子(或粪便)和气管拭子(或者气管组织)。
2.样品处理
样品置于含抗生素的磷酸盐缓冲液(pH7.0至7.4)中，抗生素视具体情况而变化，但对组织和气管拭子应含青霉素(2000单位/ml)，链霉素(2mg/ml)，卡那霉素(50μg/ml)和制霉素(1000单位/ml)，而对粪便和泄殖腔拭子其浓度要提高5倍。加入抗生素后调节pH值到7.0至7.4是很重要的。粪便和搅碎的组织，应用抗生素溶液制成10至20％的悬液。样品应尽可能快地处理，首先在室温下静置1至2小时。没有条件的话，样品可在4℃保存几天。
3.样品检查
粪便或组织的悬浮液经离心后取上清液，尿囊腔接种至少5个9至11天的SPF鸡胚，在35℃～37℃培育4至7天。收集死的和快死的以及培养结束时活下来的鸡胚尿囊液，于4℃致冷，随后检测尿囊液的HA活性。阴性者至少用另一批蛋再传代一次。
用特异性的抗血清可以证实NDV的存在，通常使用鸡的抗血清，它们是用NDV毒株中的一个毒株制备的。
试验以相同的血清PBS作连续对倍稀释，每孔0.025ml，随后每孔加入4个血凝单位的抗原0.025ml，作用15至30分钟后，加入1％的0.025ml鸡红细胞，轻轻混匀，45分钟判定结果。能完全抑制4个抗原的血清最高稀释度即为血凝抑制(HI)滴度。将板倾斜判读，凝集试验更准确。只有那些孔的红细胞同不含病毒对照孔的红细胞出现相同的“流动”时才认为是血凝抑制。
有些非鸡的禽类血清含有对鸡红细胞所特有的非特异性凝集素，因此，可用鸡血红细胞吸收试验血清，以排除凝集素或者采用研究对象的动物种的红细胞。
4.分离株毒力评价
不同NDV分离株的毒力很不相同，而且由于新城疫活苗的广泛应用，仅从具有临床症状的病禽分离出病毒进行鉴定，不能构成对ND的诊断，还应进行分离物毒力的评定。NDV分离株的致病性不能在体外进行，所以评估致病性常根据下面一种或多种试验来确定。
a)鸡胚平均死亡时间(MDT)
将新鲜的感染尿囊液用生理盐水连续10倍递增稀释成6Log10～9Log10，每个稀释度接种5个9至10日龄的SPF鸡胚，每个鸡胚接种0.1ml，随后置于37℃。剩余下的病毒稀释液保存于4℃，于8小时后，每个稀释度接种另外5个鸡胚，每个鸡胚接种0.1ml，置于37℃培养。每天观察二次，共观察7天。每次观察都要记录每个鸡胚死亡的时间。
利用鸡胚平均死亡时间可将NDV株分为强毒力型，其死亡时间低于或等于60小时；中等毒力型，其死亡时间在61至90小时之间；温和型，其死亡时间大于90小时。
