抗内毒素治疗研究现状(2)

2.2.2 抗LBP的抗体 LBP是肝脏合成的一种急性期血清蛋白，LPS在体内的作用依赖于LBP的存在。1986年Tobias首次从兔急性反应血清中分离、纯化出LBP，并证明LPS通过类脂A与LBP结合形成LPS-LBP复合物，与CD14结合激发细胞应答。Schutt通过实验发现LBP在GNB感染的生理及病理生理学中起着重要作用。动物实验证实预防性给予抗LBP抗体能保护小剂量内毒素的损害，但不能改善大剂量内毒素造成的损伤，同样说明LPS在大剂量时通过非依赖LBP途径刺激细胞应答。关于LBP抗体的保护作用，目前尚处于探索阶段。?
　　2.3 抗CD11/18抗体?
　　CD11/18复合体是一种粘附分子，是调节中性粒细胞粘附到内皮细胞的细胞表面受体，也是中性粒细胞进入炎症部位的第一步。抗CD11/18抗体抑制了中性粒细胞的粘附及向血管外迁移，说明抗CD11/18抗体在早期应用时有一定的保护作用。Gardinali等在兔腹膜炎模型中预先给予抗CD11/18抗体的家兔死亡率要比对照组低40%，但此疗效并不持久。目前，关于CD11/18的抗体治疗正在进一步研究中。?
　　2.4 鸡卵黄抗体?
　　用特定的抗原免疫产蛋母鸡后，其蛋黄中富含大量的IgY，而该抗体又来源于同一个体，在抗体的均一性上类似于单克隆抗体。IgY对酸、酶、温度具有较高的稳定性，为口服应用提供了可能。国外学者用IgY在抗轮状病毒腹泻及抗白色念珠菌感染治疗方面取得了满意疗效。用大肠杆菌J?5株作抗原免疫鸡制备抗内毒素的特异性IgY，通过口服直接从肠道拮抗内毒素有可能成为治疗内毒素休克的新途径。?
　　3 内毒素拮抗剂?
　　3.1 类脂A结构类似物?
　　Loppnow等研究发现，类脂A的生物合成前体物质及无毒类脂A均能与内毒素竞争结合LBP，从而抑制了巨噬细胞、嗜中性粒细胞活性。类脂X是大肠杆菌类脂A的单糖前体分子，也是第一个证实对内毒素有拮抗作用的分子。此后以类脂X为先导化合物进行结构修饰，得到一系列类似物，但总的看来其拮抗作用相对较低，效果也有限，不过大肠杆菌双糖前体分子类脂IV?A对内毒素的拮抗作用更强。E5531是以荚膜细菌类脂A为先导化合物，经结构修饰得到的类似物，其作用机理是通过阻断内毒素与细胞相互作用进而抑制内毒素引起的细胞活性，可抑制TNF、IL-1、IL-6、IL-8、IL-10及NO等的释放，同时E5531及E5531-LBP复合物能竞争性抑制LPS与CD14受体结合。E5531的抗内毒素活性比类脂X大大增强，现已进入Ⅱ期临床实验阶段，用于内毒素引起的发热和感染性休克的治疗。?
　　3.2 抗内毒素蛋白及多肽类?
　　抗内毒素蛋白及多肽具有杀菌、中和内毒素、抑制免疫细胞活性的作用。杀菌性/通透性增加蛋白（BPI）是多形核白细胞（PMN）的嗜天青颗粒中带正电荷的蛋白质，由456个氨基酸组成，在PMN吞噬过程中释放到吞噬泡内。BPI与内毒素有高度亲和性，能中和内毒素活性，增加细菌壁的通透性，并杀死细菌，而且瑞典Lund大学最近的一项研究表明BPI能抑制LPS诱导诱生型一氧化氮（iNO）的合成，减少NO含量，恢复血管对收缩剂的反应，预防ETM。目前研制出的人重组BPI-21?和BPI-23已被美国FDA批准进入Ⅲ期临床实验。作为一种"超级抗生素"，BPI被认为是一种存在巨大潜力的抗内毒素和GNB感染的药物，已成为研究热点。鲎抗LPS因子（LALF）是从美洲鲎中提取得到的单链多肽，体外能抑制LPS诱导人内皮细胞和鼠脾细胞的生物活性。晶体学研究发现，LALF分子中存在的β折叠反平行结构可能就是LPS的结合位点。根据BPI和LALF中LPS的结合部位以合成结构与功能和该部位相似的多肽物质是当前的研究重点。BG38就是根据BPI中82-108位氨基酸（与内毒素结合部位）片段合成的分子多肽。将BG38与钥孔嘁血蓝蛋白（KLH）载体连接，可稳定GB38结构，增强BG38对LPS的亲和力，同时克服了BG38体内生物半衰期短的缺点。在小鼠ETM模型中，BG38-KLH（350μg）几乎完全中和了血浆中内毒素（10μg），TNF-α水平也明显低于内毒素组。BU3是在合成BPI中LPS结合部位的基础上，通过分子杂交技术融合IL-8中β折叠结构，得到的含33个氨基酸序列的小分子多肽，其空间结构更近似于BPI和LALE中的LPS连接部位，因而BU3体内、体外抗内毒素活性明显强于BG38-KLH，但BU3体内中和内毒素，抑制TNF-α分泌的能力不及BPI。?