鸡新城疫诊断技术(2)

　　b)脑内致病指数(ICPI)
　　4Log2以上血凝滴度的新鲜感染尿囊液，用等渗无菌盐溶液作10倍稀释，不加添加剂，脑内接种1日龄的SPF雏鸡，共接种10只，每只接种0.05ml。每24小时观察一次小鸡，共观察8天。每一天观察应给鸡打分，正常鸡记作0，病鸡记作1，死亡鸡记作2，脑内致病指数是每只鸡8天内所有每次观察数值的平均数。最强毒力病毒的脑内致病指数将接近最大值2.0，而温和型毒株的值接近0。
　　c)静脉致病指数(IVPI)
　　血凝滴度高于4Log2的新鲜的尿囊液用灭菌等渗盐水作1∶10稀释，由静脉接种6周龄的SPF小鸡，接种10只，每只接种0.01ml。每天观察一次，共10天。每次观察要记分，正常鸡记作0，病鸡记作1，瘫痪鸡记作2，死亡鸡记作3，静脉致病指数是指10天内每次观察每只鸡记录的平均数。温和型毒株和一些中等毒力型毒株的值为0，而强毒力型毒株可达到3.0。　　但这些试验也可有较小的改动。用未稀释的尿囊液擦拭6周龄的鸡的泄殖腔和结膜代替上述试验，其目的在于区别亲内脏的强毒力型和其他强毒力型病毒。
　　●血清学试验
　　ND病毒可作为抗原，用于各种血清学试验，例如中和试验和酶联免疫吸附试验(ELISA)。目前大都使用血凝抑制试验。鸡血清在这种试验中很少有非特异性反应，所以血清不要作预处理。除鸡以外的其他禽种血清，有时对鸡的红细胞有凝集作用，故试验前应首先测定这种特性，然后用鸡红细胞对试验血清进行吸附，以排除非特异性凝集。
　　国际ND参考血清可从英国苏里州的中心兽医实验室国际生物标准实验室获得。用它来标定实验室的参考血清。
　　在诊断中血清学的值同感染家禽的免疫状态有关。如果按1∶8稀释的血清或者高于这个稀释度能抑制4个血凝单位的抗原，被判为阳性。
　　为评价鸡群的免疫状况可用血凝抑制试验，当我们正在对免疫过的鸡群进行监测，有可能检出突然升高的抗体应答，这是野毒感染所致，但应注意其他原因引起的变化，例如已免疫新城疫病毒的火鸡再感染PMV—3病毒时，滴度会升高。