1剥离前的准备
将活兔用空气注射法或药物麻醉处死后.在离头骨基部3厘米处切断颈部,使头部与身体分离。将其头部浸入10%甲醛溶液中,约1星期后取出,再投入20%盐酸溶液中,进行脱钙处理。7~10天左右头骨变软.即可进行剥离与观察。
2剥离的步骤和方法
将浸泡好的免头剥去皮肤。剪去咬肌、颞肌、颧弓.再除去下颌、眼球及头颈后部的一些肌肉后,按以下步骤进行脑的剥离。
2.1第1步
暴露脊髓背侧部。用眼科手术剪刀,沿背正中线剪开椎管,然后用镊子把剪断端向两侧拉开,在直视下分别剪断两侧椎弓,去掉背侧椎骨及韧带,使脊髓背侧部全部暴露。
2.2第2步
去除被复在大脑与小脑背外侧骨片。为了避免在剥离过程中破坏脑实质和对脑静脉窦的观察,可以确定两条剪切线。1条是与头骨正中缝平行剪切线,这条剪切线距头骨正中缝约0.5厘米;另1条线可在第1条线剪开之后,在肉眼观察下,从颅顶部开始.在大小脑分界处,分别向两侧外耳道前下方引出的1条直线。
具体方法为先从枕骨大孔开始,沿第1条剪切线依次剪开上枕骨顶间骨、顶骨、额骨、直至鼻骨上端。然后用镊子挑起切口,看到大小脑分界部位后,在此处下剪,沿第2条剪切线分别剪开两侧颈骨,一直剪到外耳道前下方。之后,再向回折转,沿眶缘剪至眶前端,用同法进行另一侧的剪切,最后横断鼻骨,这样被复在大脑背外侧的前沿骨片即可全部摘除。去除小脑的骨片应从中心各两侧开展,首先去除覆盖在小脑蚓部的头骨片.接着去除小脑半球上的骨片,最后去除包被在小脑卷上的骨片。
2.3第3步
剪断脑脊神经根及血管。剪切神经根和血管最好从脑前端开始,先把大脑嗅球部与颅底分开,抬起脑前端,依次剪断视神经.动眼柙经.滑车神经、三又神经、外展神经、面神经、位听神经、舌咽神经、迷走神经.副神经、舌下神经、脊神经根及颈内动脉血管等。如果需要观察脑垂体,可以在神经根剪断的同时,把脑垂体连同周围组织一起取下.然后再进行分离。
3注意事项
判定头骨脱钙的程度,可用针刺法进行检查,如果用解剖针针刺头骨各部位,能够扎进且不费劲,就说明达到要求了。
如果需要进行脑血管的观察,则要在兔头固定前.向头部血管内灌注填充剂。
为减少甲醛气味的刺激,在兔脑剥离前先用清水把兔头冲洗一下。
剪开椎管时,要尽量上抬剪刀,并且使之走行在硬脊膜外腔.避免伤及脊髓。
由于包被在小脑处的骨片较薄,而且与脑实质贴的又较紧,弄不好就会碰坏小脑实质,在处理时要格外小心。