猪圆环病毒病的诊断与控制(4)

　　４．４ 间接免疫过氧化物酶技术
　　将ＰＫ－１５细胞在９６孔微量培养板上长成单层后，加入１０倍稀释的待检猪血清，作用一定时间后吸干洗涤，每孔加入５０ｕｌ１０００倍稀释的ＨＲＰ标记的兔抗猪ＩｇＧ，３０℃孵育１５ｍｉｎ， 吸干洗涤后加入５０ｕｌ底物溶液，然后，终止反应。用显微镜读取结果，如观察到棕色感染细胞即为阳性。
　　４．５ ＤＮＡ原位杂交实验
用特异性核酸探针检测感染病料中的ＰＣＶ。尤其在感染的淋巴结和肺脏组织中经常出现明显的杂交信号。
　　５ 防制对策
　　５．１ 实施严格的生物安全措施
　　Ｋｉｕｐｅｌ Ｍ等（２０００）报道，ＰＣＶ２病毒能够在ＢＡＬＢ／Ｃ系小鼠中复制并产生轻微的病变，这种传染是直接的，能经过胎盘感染。相对于自然发生ＰＭＷＳ的猪及ＰＣＶ２感染的猪而言，感染小鼠体内则没有那样广泛而严重的病理变化，通过胎盘感染ＰＣＶ可复制出猪的生殖道先天性震颤Ａ２病例。被ＰＣＶ２感染的小鼠能否排毒尚不清楚，但小鼠的先天性及出生后的感染现象说明，可能由于野生小鼠作为ＰＣＶ２的宿主或传媒的潜在危险及鼠群中感染的流行。因此要避免鼠、飞鸟及其它动物接近猪场。
　　５．２ 加强良好的饲养管理
　　在国外，有人尝试使用血清疗法，在降低死亡率方面获得一定成功。具体做法是：采取ＰＭＷＳ猪场健康成年猪的血，抽出血清，每毫升加０．２５ｍｇ蒽诺沙星或氧氟沙星或氟苯尼考，也可以按每毫升血清加入欧孢美诺或华西经典４万ＩＵ，混匀后分装冷冻保存，在仔猪出生７ｄ后皮下注射３ｍｌ／头，有一定效果。但是，本病没有十分有效的治疗方法，抗生素对ＰＭＷＳ患猪无效。但抗生素（如附红散、百草圣等）和免疫增强药物（如黄芪多糖、流行针等）的使用以及良好的饲养管理有助于控制二重感染。良好的饲养管理主要包括：合适的饲养密度；良好的圈舍通风；减少环境应激；合理分群与混养；注意猪只引种；用高迪－ＨＢ按１：８００兑水加强有效消毒等等。
　　５．３ 有效预防和控制其它感染性疾病
　　Ｇ．Ｗ．Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎ等（２０００）报道，对新生仔猪接种ＰＣＶ２，诱导了典型ＰＭＷＳ的肉眼损害和显微损害，但在接种后第７周仅表现轻微的临床症状。与此相反，接种含有ＰＣＶ２和ＰＲＲＳＶ的ＴＨ可在接种后１３天产生严重的消耗性病症和典型的ＰＭＷＳ病损。有研究认为，ＰＭＷＳ、ＰＤＮＳ和ＩＰ三种由圆环病毒引起的病例中，病原都不是单一的，其中ＰＣＶ２约占了９０％以上，是主要的病原体，但ＰＲＲＳＶ各占有６０％左右，是主要的协同病原体。在ＰＤＮＳ中，细小病毒（ＰＰＶ）占了３０％。这说明，防止ＰＣＶ和使其感染恶化的二重因子，特别是细菌、支原体及其它病毒侵入猪群加重病理损伤。
　　５．４ 加强流行病学和发病机理的进一步研究
　　目前对本病的流行病学和致病机理还缺乏全面、系统的研究，因此很难提出对ＰＣＶ有效的预防和控制感染的措施。
　　５．５ 加强疫苗的研究开发
　　目前，尚没有疫苗，也没有实验性试用过。吴金花、布日额等（２００３）建议：研究一整套完善的检测方法和技术体系，搞清楚ＰＣＶ在我国的流行分布情况；其次是寻找致弱该病毒的有效方法来制备可行的疫苗或根据对ＰＣＶ全序列的分析，克隆具有免疫原性的基因并进行表达，制备基因工程苗。
　　５．６ 全面评估公共安全
　　Ｔｉｓｃｈｅｒ等（１９９５）用电子显微镜对人尿进行检查时，发现了类似ＰＣＶ的小球形粒子，此后对人、牛、鼠的血清进行ＰＣＶ抗体检查，发现伴有原因不明发热的人抗体阳性率最高达３０％，正常人为２０％，牛约３５％，鼠１２％～６９％。Ｎｉｓｈｉｚａｗａ等（１９９７）从人输血后肝炎病例中分离出ＴＴ病毒也属于圆环病毒属；Ｎａｙａｒ Ｇ Ｐ等（１９９９）、佐藤胜哉等（２０００）分别报道了牛、鸽感染圆环病毒。因此，对ＰＣＶ作为一种人兽共患病病原进行危险性评估十分重要。