羊的人工授精技术及操作要点

    羊人工授精是人为的利用器械采取公羊的精液，经过品质检查和一系列处理，再通过器械将精液输入发情母羊生殖道内，达到母羊受胎的配种方式。人工授精可以提高种公羊的利用率，既加速了羊群的改良进程，防止疾病的传播，又节约饲养大量种公羊的费用。
　　
　　人工授精技术包括器械的消毒、采精、精液品质检查、精液的稀释、保存和运输、母羊发情鉴定和输精等主要技术环节。
　　
　　1 消毒技术
　　
　　1.1 器械的消毒
　　
　　采精、输精及与精液接触的所有器械都要消毒，并保持清洁、干燥，存放在清洁的柜内或烘干箱中备用。假阴道要用2%的碳酸氢钠溶液清洗，再用清水冲洗数次，然后用75%的酒精消毒，使用前用生理盐水冲洗。集精瓶、输精器、玻璃棒和存放稀释液及生理盐水的玻璃器皿洗净后要经过30分钟的蒸气消毒，使用前用生理盐水冲洗数次。金属制品如开膣器、镊子、盘子等，用2%的碳酸氢钠溶液清洗，再用清水冲洗数次，擦干后用75%的酒精或进行酒精灯火焰消毒。
　　
　　1.2 场地的消毒
　　
　　准备一间向阳、干净的配种无菌室，要求地面平整，光线充足，面积为10～12平方米，室温为18℃～25℃。也可选择宽敞、平坦、清洁、安静的室外场所。日常消毒用1%新洁尔灭或1%高锰酸钾溶液进行喷洒消毒，每日于采精前和采精后各进行1次。每星期对采精室进行1次熏蒸消毒，所用药品是40%的甲醛溶液500毫升，高锰酸钾250克。
　　
　　1.3 羊体的消毒
　　
　　公羊实施配种前和情期母羊实施配种前，用1%新洁尔灭溶液对羊体进行反复消毒。
　　
　　1.4 消毒应注意的问题
　　
　　严格遵守消毒时间和消毒药品的配量要求;熏蒸消毒时，应关闭门窗，第2天应提前1小时到岗，敞开门窗;注意安全，防止物品损坏，每次消毒完毕，应及时关掉电源。
　　
　　2 采精技术
　　
　　2.1 采精前的准备
　　
　　2.1.1 器械的准备：所有的器械都要提前清洗、干燥、消毒，存放于消毒柜内备用。
　　
　　2.1.2 公羊的准备：种公羊第一次采精时的年龄应在1.5岁左右，不宜过肥，也不宜过瘦，初次参加采精的公羊，应先进行采精训练，方法是让其"观摩"其他公羊配种;或用发情母羊的尿液或分泌物涂抹在公羊鼻尖上，刺激性欲。采精调教训练成功后，才能进行正式操作。
　　
　　2.1.3 假阴道的安装：安装假阴道时，先将内胎装入假阴道外壳，再装上集精瓶，注意内胎平整，不要出现皱褶。为保证假阴道有一定的润滑度，用清洁玻璃棒蘸少许灭菌凡士林，均匀涂抹在假阴道内胎和前三分之一处。为使假阴道温度接近母羊温度，从假阴道注水孔注入少量温水，使水约占内外胎空间的70%，假阴道温度在采精时应保持在40℃～42℃。注水后，再通过气体活塞吹入气体，使假阴道保持一定弹性，吹入气体的量一般以内胎表面呈三角形合拢而不向外鼓出为适宜。
　　
　　2.2 采精
　　
　　采精前用温水洗种公羊阴茎的包皮，并擦干净。将台羊保定后，引公羊到台羊处，采精时采精员站立在公羊的右侧，当种公羊爬跨时，迅速上前，右手持假阴道靠在母羊臀部，其角度与母羊的阴道的位置相一致（与地面成35～45度角），用左手轻托阴茎包皮，迅速将阴茎导入假阴道中。羊的射精速度很快，当发现公羊有向前冲的动作时即已射精，要迅速把装有集精瓶的一端向下倾斜，并竖起集精瓶，送精液到处理室，放气后取下集精瓶，盖好盖，并记录公羊号，放于操作台上进行精液品质检查。
　　
　　2.3 采精频率
　　
　　成年种公羊每日采精1～2次，连采3天休息1次，初采羊可酌减。
　　
　　2.4 采精注意事项
　　
　　严格遵守消毒技术要求，所有采精物品未经消毒不得应用。采精训练是一项细致的工作，必须由采精熟练人员负责进行。所用采精器的环境条件必须严格把握，温度要控制在40℃～42℃。
　　
　　3 精液品质检查
　　
　　精液品质检查的目的是为了评定精液品质的优劣，以便决定它能不能用于输精配种，同时，也为确定精液的稀释倍数提供科学依据。
　　
　　3.1 外观检查
　　
　　3.1.1 颜色：正常的精液为浓厚的乳白色，肉眼可看到乳白色云雾状。
　　
　　3.1.2 气味：正常精液无味或略带腥味。
　　
　　3.1.3 精液量：公羊一次采精的精液量一般为0.5～2.0毫升，山羊平均为0.8～1.0毫升，绵羊平均为1.0～1.2毫升。
　　
　　经外观检查，凡带有腐败臭味，出现红色、褐色、绿色的精液判为劣质精液，应弃掉不用，一般情况下不再做显微镜检查。
　　
　　3.2 显微镜检查
　　
　　3.2.1 精子活率：精子的活率是指在38℃的室温下直线前进的精子占总精子数的百分率。检查时以灭菌玻璃棒蘸取1滴精液，放在载玻片上加盖玻片，在400～600倍显微镜下观察。全部精子都做直线运动评为1级，90%的精子做直线前进运动为0.9级，以下以此类推。
　　
　　3.2.2 精子的密度：是指每毫升精液中所含的精子数。取1滴新鲜精液在显微镜下观察，根据视野内精子多少分为密、中、稀三级。"密"是指在视野中精子的数量多，精子之间的距离小于1个精子的长度;"中"是指精子之间的距离大约等于1个精子的长度;"稀"为精子之间的距离大于1个精子的长度。为了精确计算精子的密度，可用血球计数器在显微镜下进行测定和计算，每毫升精液中含精子25亿以上者为密，20亿～25亿个为中，20亿以下为稀。
　　
　　3.3 精子质量的评定标准
　　
　　精液为乳白色，无味或略带腥味，精子活力在0.6以上，密度在中等以上（每毫升精液的精子数在20亿以上），畸性精子率不超过20%，该羊精液判为优质精液。以上几项质量标准任何一项达不到要求，均被定为劣质精液。
　　
　　3.4 精液检查时应注意的问题
　　
　　做显微镜检查时，温检箱内温度控制在38℃左右。精液品质检查要求迅速准确，室内要清洁，室温保持在18℃～25℃。精子的形态检查，一般1周内对同1头公羊精液做1次染色检查，其他时间可根据经验做直观估测。
　　
　　4 精液的稀释、分装、运输和保存
　　
　　4.1 精液的稀释
　　
　　精液稀释的目的是扩大精液量，增加每次采精的可配母羊数，提高种公羊的利用率，还可供给精子营养，增强精子活力，有利于精液的保存、运输和输精。
　　
　　4.1.1 稀释液的配制：稀释液的配方选择易于抑制精子活动，减少能量消耗，延长精子寿命的弱酸性稀释液。
　　
　　配方一：生理盐水稀释液：是用注射用生理盐水或经过过滤消毒的0.9%氯化钠溶液作稀释液。此种稀释液简单易行，稀释后的精液应在短时间内使用，是目前生产实践中最为常用的稀释液。但用这种稀释液稀释时，稀释的倍数不宜太高，一般以2倍以下为宜。
　　
　　配方二：奶汁稀释液：奶汁先用7层纱布过滤后，再煮沸消毒10～15分钟，降至室温，去掉表面脂肪即可。这种稀释液稀释效果好，但稀释倍数不能太高，以3倍以下为宜。
　　
　　配方三：葡萄糖卵黄稀释液：在100毫升蒸馏水中加葡萄糖3克、柠檬酸钠1.4克，溶解后过滤3～4次，蒸煮30分钟后灭菌，降至室温，再加新鲜卵黄（不要混入蛋白）20毫升，再加青霉素10万单位振荡溶解。这种稀释液有增加营养的作用，可作7倍以下的稀释。
　　
　　4.1.2 精液的稀释倍数：要根据精子密度、活力而定稀释比例，稀释后的精液，每毫升有效精子数不少于7亿个。
　　
　　4.1.3 精液稀释的操作步骤：根据镜检得出精子密度确定稀释倍数，根据稀释倍数计算出应加入的稀释液的量，用量杯量取应加的稀释液量。稀释前将两种液体置于同一温水中，然后将稀释液沿着精液瓶缓缓倒入，为使混合均匀可稍加摇动或反复倒动1～2次，稀释完毕后，立即进行活力镜检，并将镜检结果填人采精登记表。
　　
　　4.1.4 精液稀释应注意的事项：稀释液温度与精液温度保持一致，在20℃～25℃室温和无菌条件下操作，精液稀释的倍数应根据精子密度而定，一般为1～3倍，稀释后的每毫升有效精子数不能低于7亿个。
　　
　　4.2 精液的分装
　　
　　将稀释好的精液根据各输精点的需要量分别装于2～5毫升小试管中，精液面距试管口不少于0.5～1.0毫升，然后用玻璃纸和胶圈将试管口扎好，在室温下自然降温。分装后贴上标签，标签上注明精液采出的日期、时间、活力、密度、公羊的品种。
　　
　　4.3 精液的运输
　　
　　在近距离运送精液时，不必进行降温，将装有精液的集精瓶或小试管口封严，用棉花包好放入保温瓶中即可。远距离运输时，可用直接降温法降温。运输精液时要防止剧烈震动，降温或升温都要缓慢进行，每次输送的精液都要注明公羊号、采精时间、精液量和精液品质。
　　
　　4.4 精液的保存
　　
　　4.4.1 常温保存：精液稀释后，保存在20℃以下的室温环境中。在这种条件下，精子运动明显减弱，可在一定限度内延长精子存活时间。常温保存只能保存1天。
　　
　　4.4.2 低温保存：在常温保存的基础上，温度进一步缓慢降至0℃～5℃之间。可用直接降温法，将精液装入小试管内，外面包以棉花，再装入塑料袋内，直接放入装有冰块的广口保温瓶或保温箱中，使温度逐渐降至2℃～4℃。低温下保存的有效时间为2～3天。
　　
　　4.4.3 冷冻保存：精液的冷冻保存要求的技术、环境和设备条件较严格，操作过程也比较复杂，这里不加详述。
　　
　　5 发情鉴定
　　适时配种是提高羊人工授精受胎率的关键措施之一，母羊发情的主要表现：食欲减退、兴奋不安、嘶鸣、爬跨其他羊或接受其他羊爬跨而静立不动;阴门红肿，频频排尿而流出透明的黏液;用试情公羊与母羊接触（隔着试情架），母羊表现温驯，并将后躯转向公羊，阴门肿胀;用阴道开膣器插入阴道，使之开张，发情盛期的母羊阴道潮红、润滑，子宫颈口开张，分泌的黏液呈豆花样。
　　
　　6 输精
　　
　　6.1 输精前的准备
　　
　　6.1.1 人员的准备：输精人员应穿工作服，用肥皂水洗手擦干，用75%酒精消毒后，再用生理盐水冲洗。
　　
　　6.1.2 输精器械的准备：把洗涤好的开膣器、输精枪、镊子用纱布包好，一起用高压锅蒸汽消毒。
　　
　　6.1.3 母羊的准备：对发情母羊进行鉴定及健康检查后，才能输精，母羊输精前，应对外阴部进行清洗，以1/3000新洁尔灭溶液或酒精棉球进行擦拭消毒，待干燥后再用生理盐水棉球擦拭。
　　
　　6.1.4 精液的准备：将精液置于35℃的温水中升温5～10分钟后，轻轻摇匀，做显微镜检查，达不到输精要求的不能用于配种。
　　
　　6.2 输精方法
　　
　　将用生理盐水湿润后的开膣器插入阴道深部触及子宫颈后，稍向后拉，以使子宫颈处于正常位置之后轻轻转动开膣器90度，打开开膣器，开张度在不影响观察子宫的情况下开张的愈小愈好（2厘米），否则易引起母羊努责，不仅不易找到子宫颈，而且不利于深部输精。输精枪应慢慢插入到子宫颈内0.5～1.0厘米处，插入到位后应缩小开膣器开张度，并向外拉出1/3，然后将精液缓缓注入。输精完毕后，让羊保持原姿势片刻，放开母羊，原地站立5～10分钟，再将羊赶走。
　　
　　6.3 输精次数和输精量
　　
　　输精次数：母羊1个情期应输精2次，发现发情时输精1次，间隔8～10个小时应进行第2次输精。输精量：每头份的输精量，原精液为0.05～0.10毫升，稀释后精液应为0.1～0.2毫升。
　　
　　6.4 输精时应注意的问题
　　
　　输精人员要严格遵守操作规程，输精员输精时应切记做到深部、慢插、轻注、稍停。对个别阴道狭窄的青年母羊，开膣器无法充分打开，很难找到子宫颈口，可采用阴道内输精，但输精量需增加1倍。输精后立即做好母羊配种记录。每输完一只羊要对输精器、开膣器及时清洗消毒后才能重复使用，有条件的建议用一次性器具。