牛冷冻精液人工配种技术

    冷配技术是在常温人工配种基础上发展起来的先进繁殖技术，由于冻精液能够长期贮存、运输、配种，不受时间、地乃至国家限制，能够最大限度的发挥种公牛的繁殖能力。这时推广良种、加速改良具有重要意义。 

    冷配和常温配种相比，技术大体相同。不同点常温配种的采精和稀释过程，冷配有精液解冻过程于之相当。冷配技术主要包括发情鉴定、精液解冻、人工输精三部分内容。依工作顺序分述如下。 

    一、母牛的发情鉴定 

    母牛发情鉴定是根据母牛发情症  状表现规律识别母牛是否发情及所处发情过程中的阶段的技术，适时精是提高受胎率的保证，母牛发情虽然有规律，但是，公牛敏感，人不敏感，而冷配母牛发情鉴定，又只能靠畜主的观察和配种员的判断，所以，研究母牛发情规律是掌握发情鉴定技术的前提。 

    1.母牛发情规律  母牛性成熟以后，除任娠外，全年都要台出现发情，发情是周期性进行的，一个情期平均21天。在人工授精上，为了单述方便，根据发情动物外部症  状表现的阶段性，人为的把一个发情周期分为四个时期。 

    ⑴发情前期，是发情前的准备阶段。 

    随着卵巢上卵泡的生长发育，生殖器官供血增加，上皮粘膜增生，分泌增强，阴道轻度充备，阴道中有稀薄粘液出现，阴户渐大，母牛精神出现轻度不安，慕雄，但是不接受公牛爬跨。本期特点，外部发情症  状轻微易被人忽视。进行性变化，时间3-5天。 

    ⑵发情期。是母牛性谷旺盛的时期    发情前期生理的和种变化更为显著，卵巢上孵泡生长  出表面，但未成熟。母牛兴奋不安，时常哞叫，食欲减退，有时追随或接受其它母牛爬跑，当公牛追随爬时，站立不动，臀部向后用力，求配欲强烈，外阴部肿胀，泌尿前庭、工有光泽、子宫颈口开张，阴门流出大量纤维状透明粘液，尾根及臀部被毛时常被污染。持续时间！2-18小时，高潮过后，性欲下降。 

    ⑶发情后期。是发情外部症状逐渐消退期。 

    发情母牛从拒绝交配开始，热恋逐渐降温。转入安定。阴道分履物粘性下降，数量减少，颜色加深，最后变成乳白色，似浓炼乳状或米黄脂状，子宫颈口收缩，阴道充血下降。这个时期，多数母牛卵泡已经成熟或接近成熟。以后破裂排卵，在排卵窝处出生周期性黄体。同时期特点：外部发情症状呈退性变化。经过时间3-5天。 

    ⑷休情期。时间长达10-14天。 

    本期表面上是静止的，无性欲表现，一切正常。实质上在周期黄体的作用下，子宫增厚，分泌旺盛，为胎儿营养准备条件。如果卵子受精，周期性黄体长成永久性黄体直至妊娠结速前消失。如果没受精。在休情期末黄体溶解，卵巢上的卵泡又重新开始发育，转入下一个发情周期。 

    2.发情鉴定的方法，母牛发情鉴定的方法很多，有物理的、有化学的。 

    ⑴外部观察法。主要是外部表现和精神装态来判断其发情情况。例如：是否兴奋不安、食欲减退、外限部是不肿胀，湿润，流有粘主以及粘液以及粘液的数量、颜色和粘性等。 

    ⑵试情法。用公牛试情，通过母牛的性欲上对公牛的反应情况来判发情程度，效果很好。 

    ⑶直肠检查法。是将手伸入直肠，隔着肠壁检查卵巢发育情产中锭种方法检查准确，而且可以发现妊娠情况和疾病情况等，输精员应该掌握这种方法。 

    ⑷阴道检查法。是将开殖品伸入阴道中，借助手电筒等光源观察阴道、子宫颈  的颜色、肿胀程度，开口大小和粘液的数量、颜色、粘度等，判断发情程序。本法不能精确的判定排卵时音，在实际操作中已不多用。 

    此外，配种员在发情鉴定前主尖主动向畜主了解母畜繁殖历史及发情过程，在发情鉴定时要同时就髟几种方法，进行综合鉴定，提高准确率。 

    3.适宜的授精时机  母牛适宜授精的时间要在综合发情定的基础上确定，具体应考虑以下几个问题。 

    ⑴母牛排卵时间。发情母牛排卵的时间多发生在发情结束后8-12小时，而且多数排卵发生的深液至次日凌晨。 

    ⑵卵子保持受精能力的时间。卵子和精子在输卵管上1/3处的壶腹  部受精。卵子排出后到达受精部位需要6-12小时，在过来腹  部保持受精能力的时间约为8-12小时，以后卵子衰老失去受精能力。 

    ⑶精子到达受精部位的时间。输精！5分钟后，活力强的少数精子主不可以到达输卵管受精部位，其余陆续到达。 

    ⑷精子在母牛生殖呆持受精能力的时间。输精后，精子虽然很快到达输卵管壶腹  部，但不具备受精能力，在生殖道中必须经过获能过程才具有受精能力。  精子获能过程需要20小时左右时间，获能后的精子保持受精能力的时间约为30小时。 

    综上所述，镦子比精子保持受精能力的时间短，卵子进入输卵壶腹部后数小时内，如遇不上获能的精子就衰老失去受精能力。所以，最适宜的授精时间是在卵子到达受精部位时，才能与等在那里的有效的足够数的精相遇，在生产中，如果一个发情期一次输精，要在母牛拒绝交配后6-8小时内进行，若一个情期两  次精，第一次要在母牛接受爬跨后8-12小时进行，间隔6-10小时再进行第二次输精。老龄、体弱和夏季发情的母牛发情持续期相对缩短，配种时间要适当提前。直肠检查能准确的掌握卵泡发育情况，在卵泡成熟后精受胎率最高，而排卵后输精，则受胎率很低。 

    二、冷冻精液的解冻 

    精液解冻是精子从超低温的冬眼状态进入常温运动状态的复苏过程。解冻的速度筷  子通过的害温区的伤害小，复苏率越高，所以速度是解冻技术的核心。 

    冷冻精液通常分颗粒型和细管型两种。 

    1.颗粒精液解冻  解冻颗粒精液的  解冻液，安瓶二液可以较长时间的保存，规模1-1.5毫升，解冻一粒精液只需一瓶二液。 

    解冻时，先将二液安瓶，放入40℃的温水中加热至等温，打掉安瓶的瓶颈，用颈  过冷的长柄镊子，迅速夹取一粒精液放在二液中，轻轻摇动，使之快化，当颗粒融化3/4时，马上把安从温水中提出，继续摇动，直至全部融化，镜检备用。 

    2.细管精液解冻  细管精液解冻分开解汉和湿解法。 

    ⑴干解法。把从液氮中取出的液细管直接放在手掌中搓动，靠手温融化，这种方法升温缓慢，解冻质量低，一般不常用。 

    ⑵湿解法。把从液氮中取出的精液细管直接投入40℃的温水中融化。抽车管时棉塞端朝下，后封口向上，并且使封品处露出水面，待细管颜色一变，立刻取出，剪掉后封口端，挤出少许精液涂片检，然后装入输精枪套帽前端。 

    无论哪种冷冻精液解冻都是不易保存，最好是在输精前现场解冻，如果必须进行短途运输或暂时贮存的，要放在2-8℃的温度条件下。 

    三、人工输精 

    输精是输精员利用输精器把精液准确无误的送到子宫颈的深处或子宫内的操作过程。无蓖操作是保证母牛健康和提高受胎率的需要。要生产中，水冰严，准备工作  单从事，成为影响受胎率的主要因素之一。 

    1.输精前的准备工作 

    ⑴解冻室。配种站的精液解决冻要在室内进行，室内要无烟、无尘、无味、消毒卫生，闲人免进。 

    ⑵器材。要备备备足，经过30分钟蒸气消毒景士后使用，酒精消毒必须待酒精全部挥发后使用，输精器不经消毒不能连续使用。 

    ⑶母牛先拉入配种架固定，缰绳  要拴短拴牢，尽量限制头部摆，后边围绳可以不用或松驰，外阴部要洗净、消毒、擦干。 

    ⑷输精员应穿好操作服，剪短、磨光指甲，准备直肠检查的手及前臂洗净、擦干，涂上润滑剂。 

    ⑸精液。精液要在输精操作前由输精员或在输精时由助手同时解冻，颗粒精液要抽在输精器中，细管精液须装在输精枪中。 

    2.握颈输精  输精的方法有二种，即直肠握颈法和阴道法。阴道法授精部位较浅，受胎率  生产上已经再不应用了直肠握颈法广泛应用，做法如下。 

    在做好准备工作后，输精员站在母牛的斜后方，助手或畜主把牛闰向精液员前臂的外侧，术手五指拼扰，捏成锥形，徐徐伸入直肠排入蓄粪，向盆腔底部前后、左右探索子宫颈纵向握在手中，用前壁下压会阴，使阴门开张，另一只手执输精器乘机插入阴门，先向斜上前方插入10-15厘米越过尿道口，再转为平插直达子宫颈。此时两手配使使精器前端对准子宫颈外口挺进，遇到宫颈内壁皱臂挡阴时，及时调整输精器前端方向，避开前进，遇到母牛骚动不安或强烈怒责时，要暂停操作，待缓解后继续进行。当输精器入5-8厘米时，即可注入精液，始遇到注入精液受阴时，可事撤，输精器再交玫，为了防止注入的精液被吸加原野不止以囊的手不要松开把输精器抽出，然后术手从直肠里抽出，即可完成输精。 

    在输精过程中，首先要注意人畜安全，其次动作要温和敏捷，避免操作阴道、子宫、子宫颈内壁和直肠粘膜。