食用菌接种技术要点

    接种是食用菌生产中的关键环节之一，女蜾接种技术不过关，即会造成杂菌污染，成活率低而前功尽弃，更谈不上栽培了。无论是菌种分离、传代还是扩繁，都要在无菌条件下严格按照无菌操作规程进行。具体要点如下：

    1 人员素质

    1.1 接种人员要具备认真、细致、自觉、对事业负责的精神。

    1.2 接种人员要牢固树立无菌观念，不能存在侥幸心理，切不可麻痹大意。

    1.3 接种人员具备鉴别菌种优势的能力，不合格的菌种不能用于生产。

    2 环境消毒

    2.1 新制作的或是闲置时间超过15天的接种箱，首次使用前，箱体内、外需用0.1%升汞水或2%来苏儿彻底刷洗消毒。

    2.2 闲置超过30天的接种室和缓冲间重新使用前，墙壁需用2%来苏儿喷湿消毒。对新改建或闲置3个月以上没用的接种室，使用前，室内墙壁要用石灰浆粉刷，水泥地面用清水冲刷。

    3 空间消毒

    将待接种的培养基放入接种箱或接种室后，需对箱或室内进行空间消毒。

    3.1 如果是母种传代或接种量少的原种，可利用接种箱同时放入所用的接种工具，然后用化学药物熏蒸或紫外线照射进行空间消毒30分钟。

    3.2 如果是量大的原种或三级种生产，培养基放入接种室，同时放入所用的接种工具，再用化学药物熏蒸，同时配合紫外线照射进行空间消毒40分钟左右。

    3.3 缓冲间内放置作业服、消毒水、面盆等，接种前要在缓冲间内做好一切准备工作。进入前开启紫外线灯照射30分钟，离开缓冲间进入接种室时仍需开启紫外线灯照射，直至接种结束。

    4 携带物消毒

    4.1 将母种试管或原种瓶（袋）的棉塞齐管或瓶口剪去，母种试管用75%酒精棉擦洗外壁，原种瓶（袋）用0.25%高锰酸钾水清洗外壁，然后随接种人员带入接种箱（室）。

    4.2 接种人员经过缓冲间更衣、洗手进入接种室后不得随便出入，尽量少走动和避免空气对流。

    5 杀菌

    利用酒精火焰进行必要的杀菌。

    5.1 首先将接种工具（钩、铲、刀等）在酒精灯火焰上烧灼后，置于清洁的空试管内冷却备用。

    5.2 将试管母种或原种瓶放在万能夹上，旋转式取下棉塞，右手端起酒精灯，让火焰接触管口或瓶口，左手将试管或原种瓶慢慢旋转3～4周，然后将试管或原种瓶固定牢。

    6 接种

    母种分离、传代或扩繁时，试管口要控制在离酒精火焰10cm范围内进行操作。

    6.1 用杀菌后的备用接种钩，除去母种斜面的尖端部分以及中央的母种块，随后将接种钩放回母种试管。

    6.2 左手持预接种的试管培养基，管口稍向下倾斜，用右手小拇指和无名指、食指和中指持接种钩，从母种试管内钩取直径约2mm大小的种块，放入预接种培养基斜面中央，抽出接种钩，放回母种试管，轻燎右手所持棉塞，旋转式塞入接过菌的试管，由右手放到适当位置，连续完成所有预接种试管。

    注意：①每次接种时间最长不得连续超过2小时。②操作时，接种工具尖端和种块不能接触到管口和外部其它物体。工具尖端碰到外面物体要重换工具，种块碰到外面物体则作废。③一般用种量：每支试管母种可扩繁一级种100支左右；扩接原种6～8瓶。

    7 两种特殊接种法

    7.1 密环菌传代扩繁时，要趁培养基有凝结水时进行，接人种块直径不能小于0.5mm，同时还要带有菌索。每支试管培养基可同时接入3块母种，每块母种都要用接种工具按压至母种块陷入培养基约2mm，以利菌索尽快伸入培养基；接种原种时，每支试管可接种原种3～4瓶。

    7.2 元蘑菌传代扩繁时，种块直径不能小于0.3mm。接种时，将种块从试管培养基尾部约1.5cm处顺斜面中间纵向划线至斜面尖端约2cm处放下种块，此法可使培养周期缩短3天左右。

    8 安全

    8.1 点燃的酒精灯不能靠近棉塞、塑料等易燃物。

    8.2 点燃的酒精灯要放牢，在操作过程中严防将酒精灯碰翻，以免引起火灾。

    8.3 接种箱或接种室利用化学药物进行空间消毒时，要计算空间容积，按照用药说明使用，不许任意加大用药量，避免造成药害。

    8.4 紫外线可损伤人体，特别是可引起电光性眼炎。因此，不要在开启紫外线灯的情况下工作，更不能直视正在开启的紫外线灯。