1 流行病学调查
某实验场引进98只奶山羊，因连续阴雨，一直圈养，於7月13日开始放牧，3天后开始发病，发病羊达39只，发病率为40%。急性死亡12只，死亡率为31%，病羊食欲减少，轻度腹泻，大便略有黏液。呼吸加快，咳嗽，鼻流清涕或脓涕。体温41.3℃，脉搏100次/min，呼吸65次/min，瘤胃蠕动2~3次/min，轻度臌气，反刍减缓或停止，肠蠕动音亢进，腹痛，肌肉抽搐，眼球转动，磨牙、流涎。死前呈划水样，于1~2 h内死亡。病羊中以母羊占60%，公羊占20%，幼龄小羊占20%。在饲养及治疗过程中，由外伤或被咬伤后感染造成2名女饲养员及1名兽医共发病3人，患者局部伤口剧痛、肿胀，呈紫红色，周围皮肤高度水肿，苍白发亮，并出现大小不等的水疱，身感寒颤等症状。?
2 病理剖检
腹部皮下及结缔组织呈暗红色气肿及胶冻状水肿，触之有捻发音。口腔流出带有气泡的酸臭红褐色液体。胸腔积有淡黄色及红褐色带泡沫样的液体。心包积液，有淡黄色或白色纤维素样渗出物，左心外膜及冠状脂肪有针尖状出血点；肺尖叶呈间质性气肿、水肿及肝变，有大小不等的出血斑及出血点；肝表面布有白色坏死斑点；肺组织呈多孔海绵状。脾肿大，表面有出血点，切面多孔。肾表现有白色坏死斑，切面多孔。肾表面有白色坏死斑，切面多孔。腹腔积大量黄色腹水。小肠、空肠及回肠出血明显，其中回肠有2~3个钮扣状溃疡。胸腺、肝门、肺门及肠系膜淋巴结呈暗灰色水肿；网胃、辨胃黏膜出血尤以真胃出血明显。?
3 细菌培养与分离
3.1 取肝、胸水、肾、腹水触片，行美蓝、革兰氏、瑞氏及姬姆萨氏染色，均可见有单个、2个相连及少数3~4个短链排列、 菌体周围有膜、菌体中央有芽孢的原虫种的研究结果吻合。
3.2革兰氏阳性大的梭状杆菌。?
3.2 分别取肝、心血、脾、肾及肺病料划线接种S.S.麦康凯、伊红美蓝、营养琼脂及羊血液培养基，分别用需厌法及CO2烛缸厌氧法于37℃恒温箱培养，结果为：（1）需氧培养48 h，S.S.及麦康凯培养基上菌落生长较为贫脊，直径约1 mm。营养琼脂培养基上长出珍珠状，湿润隆起的淡灰色菌落，直径约1~2 mm。血清培养基上长出边缘整齐有微弱α溶血环、内圈呈透明的β落血环的淡灰色菌落，溶血环直径约2~3 mm。伊红美蓝琼脂培养基上长出线状粉红色菌落，直径约1~3 mm。(2)厌氧培养48 h后可见上述各培养基上均长出丰盛的菌落：其中血液培养基上仍可见直径约4~5 mm的双重溶血环，在室温中放置6~7 h后变成淡绿色。?
3.3 取血液培养基上具有双重溶血环的典型纯培养物少许接种10%新鲜羊血清琼脂培养基，厌氧培养18 h后，长出中尖微隆起呈圆盘状淡灰色湿润菌落，用放大镜观察，菌落表面有放射状条纹，边缘呈锯齿状，外观似勋章样。?
3.4 挑取厌氧培养的单个典型菌落少许接种于1.6%?溴甲酚紫牛奶培养基，37℃需氧条件下培养12 h，可见淡蓝色的溴甲酚紫牛奶培养基颜色完全消退，凝固海绵多孔海绵状蛋白呈螺旋状上升，液面表层淡黄色，并产生小气泡，用pH试纸检侧pH为5.3，呈暴烈发酵反应，而对照管不变色。?
3.5 分别无菌吸取0.1 ml的胸腔积液及发酵后的乳清接种厌氧肝片肉汤和厌氧肉汤，37℃ 6 h及23 h可见厌氧肝片肉汤均匀混浊，肝块变粉红色，管底形成灰白色沉淀，液面均长有白色菌膜。继续培养肉汤澄明，液面产生多数小气泡，测得气体pH值为5.6，开盖后闻到酸臭味。?
