无菌蔡纪新发病羊的水疱液、脓疱液等病料接种于普通琼脂、麦康凯琼脂和血平板上,37℃培养24-48h,均未见细菌生长(对发病后期,可分离到致病性大肠杆菌、沙门氏菌等这与病程较长、机体抵抗力下降引起继发感染有很大关系)。
3.2显微镜检查
(1)无菌采取新发病羊的水疱液、浓疱液等病料直接涂片,革兰氏染色鹤瑞氏染色,均未发现细菌。(2)取新形成的丘疹,用其切面涂片,以莫洛佐夫镀银染色法染色,在显微镜下观察,可见胞浆内有深褐色的球菌样圆形小颗粒,散在或成双、成堆分布。(3)采取丘疹组织涂片,用姬姆萨或苏木紫—伊红染色镜检胞浆内的包涵体,前者包涵体呈红紫色或淡青色,后者包涵体呈紫色或深亮红色,周围有清晰的晕。
3.3动物回归实验
将病羊身上的丘疹剪下,用生理盐水制成10%乳剂,加入青霉素、链霉素各2000IU/ml处理,以3000r/min离心10min,取上清液,经菌检为阴性,给3只5月龄的健康绵羊脉动注射,每只10ml,3天后相继发病,出现痘疹。
4防治措施
4.1加强管理(1)病死羊和剖解羊一律深埋或烧毁,对病羊立即进行隔离治疗,封锁疫区。用2%烧碱溶液对羊舍和污染的环境进行严格消毒。(2)减少各种应激因素对羊群的刺激,保持羊舍清洁、卫生、干燥、宽敞、温暖;饲喂富含营养的饲料,增强羊只的抵抗力。(3)对未发病的羊只,无论大小、妊娠与否,一律股内侧皮内注射羊痘鸡胚化弱毒疫苗,每只0.5 ml。
4.2病羊用0.1%高锰酸钾溶液冲洗口腔和眼结膜,并在口腔溃疡处涂抹紫药水;皮肤上的病灶用2%硼酸溶液充分冲洗,涂抹5%的碘酊,2-3次/d。