3 实验室诊断
(1)取病死猪肿胀部位的脓汁置于载玻片上,蘸取无菌生理盐水混匀;取肝脏、肺脏、肾脏的病变部位触片;取心血做血涂片、脾脏触片。革兰氏染色后镜检,可见有多量(脓汁片)或散在(其他组织片)单个圆形阳性球菌。
(2)取各部位脓汁,病死猪的心、肝、脾、肺脏、肾、肠系膜淋巴结无菌接种于普通肉汤、普通琼脂和鲜血琼脂上,37℃培养24 h。普通肉汤均匀一致浑浊;在普通琼脂和鲜血琼脂上长出边缘光滑、隆起、湿润的灰白色菌落;室温放置后部分菌落逐渐呈土黄色至金黄色。取坏死部位的皮肤和皮炎型病猪的皮肤接种于含10% NaCl的普通琼脂培养基上37℃培养24 h,长出灰白色菌落,再转接种于普通琼脂、普通肉汤和鲜血琼脂上,培养特性同上。将上述培养物涂片,革兰氏染色镜检,见单个、成对或葡萄串状阳性球菌。
(3)血浆凝固酶试验表明,不同猪体内分离出的细菌3株试验菌株均在?2~6 h内使血浆凝固。对照管不凝固。
(4)其他生化试验:溶血性试验阴性;过氧化氢酶试验阳性;分解葡萄糖、甘露醇、蔗糖、乳糖、麦芽糖产酸不产气;能在含7%NaCl的琼脂培养基上生长。
(5)选取临床健康、体重20g重的小鼠6只分为3组,任取上述2株分离菌的18h普通肉汤培养物,分别接种第1、2组试验组,每只皮下接种肉汤培养物0.3ml;第3组对照组皮下接种无菌肉汤0.3ml。结果试验组小鼠80h内全部死亡,取病料培养回收到接种菌。对照组健活。
(6)选取3株菌、28种药敏纸片进行了药敏试验结果,3株菌试验结果基本一致,即对菌必治、庆大霉素、丁胺卡那霉素、头孢氨苄、先锋噻肟、环丙沙星高敏;对新霉素、先锋霉素、红霉素、卡那霉素、恩诺沙星、磺胺 TMP、四环素、新生霉素、强力霉素、林可霉素、乙酰螺旋霉素、壮观霉素、苯唑青霉素、去甲万古霉素、链霉素中度敏感;对磺胺甲基异恶唑、青霉素、氨苄青霉素、土霉素、氧氟沙星、阿莫西林、氟哌酸不敏感。