聚乙二醇提取鸡新城疫康复鸡蛋黄抗体及应用

    笔者利用新城疫康复鸡所产的蛋试制高免蛋黄液，并用聚乙二醇6000提取蛋黄抗体液，用于控制鸡新城疫，效果较好，现报道如下。

    一、康复鸡只选择

    我县张庄镇田娄村张某饲养的2000只海赛克斯商品蛋鸡，按孵化场提供的免疫程序，于55日龄、110日龄用NDⅠ系疫苗和鸡新城疫油剂灭活疫苗接种，到190日龄突发以呼吸道哕音为主要症状的鸡新城疫，产蛋率下降10%。用NDⅠ系疫苗3倍量和英特威产鸡新城疫油剂灭活疫苗1毫升/只，分别肌肉注射，第7天后死亡停止，死亡率3.1%，全群鸡采食量增加，产蛋率回升，至229日龄产蛋率达95%。测20只鸡血样，ND抗体HI效价平均达1∶2E14。

    从鸡群中挑出发病后康复的并且鸡白痢杆菌、支原体全血平板凝集试验全部阴性的高产鸡50只，隔离饲养，加喂抗生素和电解多维，适应3天，收集所产蛋备用。

    二、蛋黄抗体液制备

    将收集的鸡蛋洗净，用0.5%福尔马林浸泡消毒20分钟，取出晾干，无菌分离蛋黄，加2.5倍的生理盐水稀释，再按每500毫升蛋黄液加50毫升25%聚乙二醇 6000（约占蛋黄液的2.5%），8000转/分匀浆3分钟，倒入玻璃缸内，置0～4℃冰箱内8～12小时，取出，这时蛋黄液变为两层：上层为黏稠的脂蛋白（弃掉），下层为含免疫抗体的清液，用虹吸法取出下层清液，装瓶，加青霉素、链霉素2000单位/毫升，即为蛋黄抗体液，体积为原蛋黄液的55%左右。

    三、检验

    1.无菌检验：取成品蛋黄抗体液0.2毫升，接种于普通营养琼脂培养基和厌气肉汤培养基，37℃培养48小时，无细菌生长。

    2.效价测定：对每次蛋黄抗体液作鸡新城疫抗体效价测定，HI值均在1∶2E12以上。

    3.安全检验：选择体重0.5千克蛋公鸡，肌注蛋黄抗体液2毫升/只，观察一周，未见异常反应。

    四、临床应用体会

    用ND康复鸡蛋制备的蛋黄抗体液，紧急控制ND发病鸡31群21300只鸡，体会如下：

    1.对ND发病鸡群，立即肌注蛋黄抗体液1～3毫升/只，一般2～3天即可控制死亡，效果明显。之后，3～5天或据ND抗体监测结果，再接种鸡新城疫Ⅰ系或弱毒疫苗，同时配合新城疫油剂灭活疫苗，使机体内免疫抗体保持一致持久，内服抗生素和电解多维，预防继发感染，增强机体抗病力。

    2.蛋黄抗体液应冻结保存，-5℃保存半年，-10～15℃保存一年，效价不变，解冻后稍有沉淀，振摇刀：即可使用，切勿将沉淀弃掉；忌反复冻融，否则会降低效价，影响防制效果。