一例新城疫的实验室诊治报告
时间:2009-06-04 00:47 来源:互联网 责任编辑:admin
核心提示:鸽新城疫又称为“鸽瘟”,是由新城疫病毒引起的一种烈性传染病,死亡率为5%-95%,给养鸽户造成了很大的经济损失。
1发病情况及临床症状
该养鸽户饲养1.5岁的种鸽620只,10月18日给种鸽肌肉注射鸡I系苗1头份/只,30-40日龄肉鸽200只,但未免疫疫苗。鸽群发病2天,种禽死亡2只,死亡率为0.32%,肉鸽死亡78只,死亡率为39%,使用恩诺沙星进行治疗,但效果不明显。病鸽精神不振,食欲减退,饮水量增加,羽毛松乱无光泽,垂头缩颈,翅膀松散下垂,口鼻分泌物增多。部分鸽子还出现神经症状,如头颈扭曲,头向后仰。粪便先由黑色粒状,后转为黄绿色稀便。
2剖检病变
喉头、气管分泌物增多,嗦囊内充满酸臭液体及气体,腺胃乳头有出血点,心包周围、肝表面覆盖一层黄色胶胨样物。十二指肠、小肠出血,肠系膜脱落、溃疡,盲肠扁桃体肿大出血。种鸽卵巢出血。
3实验室诊断
3.1样品处理
取脾和肺进行研磨,加人生理盐水制成20%的乳剂,反复冻融3次,于零下20度保存以备用。
3.2 RT-PCIZ
RT-PCR结果见图1。
RNA提取与反转录(RT)。取制备好的病料悬液,按RNA提取试剂盒说明书进行提取,得到的RNA模板立即用于反转录。反转录体系为25微升,RNA模板16微升,引物M1 2微升,5xBuffer5微升,dNTP 2微升,RNasin0.5微升,M-MLV0.5微升。置PCR仪中42℃反转录1小时,95℃5分钟,反应结束后直接使用或于零下70度保存。
PCR扩增。取反转录产物5.0微升加入到新城疫PCB反应A混合物的PCB管中,混匀,2000转/分钟离心10秒,立即进行PCR扩增;同时设阴阳性对照。扩增条件为94度4分钟,94度30秒,56度50秒,72度50秒,35个循环,72度延伸5分钟,4度保存。取反应A的反应物0.5微升加入到新城疫PCB反应B混合物的PCR管中,混匀,2000转/分钟离心10秒,立即进行PCR扩增;同时设阴阳性对照,扩增条件为94度4分钟,94度30秒,56度50秒,72度50秒,35个循环,72度延伸5分钟,4度保存。
琼脂糖凝胶电泳。取PCR产物5微升,于1%琼脂糖凝胶中电泳,凝胶牛含有13.5微升/毫升溴化乙锭,电泳缓冲液为0.5xTAE,80伏30分钟,电泳完后于紫外灯下观察拍照,有460bp的目的带出现。
3.3病毒分离鉴定
将3.1处理的样品,加入“双抗”(青霉素、链霉素)(2000单位/毫升),感作l小时,然后离心取上清液接种10日龄的SPF鸡胚2枚,37度孵育,接种后鸡胚分别在36小时和40小时死亡,收集尿囊液,做红细胞凝集试验(HA),红细胞出现凝集,HA效价为28和27。
用新城疫阳性血清做血凝抑制试验(HI),可抑制新城疫病毒对红细胞的凝集,抑制价是27。
由此证明此鸽群发生的为新城疫病。
4防治
鸽群紧急免疫新城疫Ⅵ系苗,种鸽4羽份/只,肉鸽3羽份/只进行滴鼻。
每天的饮水中加入0.05%的氟苯尼考和3%的葡萄糖供鸽子饮用,连用3天,增强鸽子的抵抗力,防止继发感染。
保持饲料和饮水的清洁卫生,保证鸽舍的通风干燥,加强鸽舍的保暖措施,彻底清除鸽舍内的粪便及污物,用消毒剂进行消毒。
3天后回访,除肉鸽紧急免疫后死亡8只外,其余的肉鸽、种鸽病情已得到控制,并恢复正常。
该养鸽户饲养1.5岁的种鸽620只,10月18日给种鸽肌肉注射鸡I系苗1头份/只,30-40日龄肉鸽200只,但未免疫疫苗。鸽群发病2天,种禽死亡2只,死亡率为0.32%,肉鸽死亡78只,死亡率为39%,使用恩诺沙星进行治疗,但效果不明显。病鸽精神不振,食欲减退,饮水量增加,羽毛松乱无光泽,垂头缩颈,翅膀松散下垂,口鼻分泌物增多。部分鸽子还出现神经症状,如头颈扭曲,头向后仰。粪便先由黑色粒状,后转为黄绿色稀便。
2剖检病变
喉头、气管分泌物增多,嗦囊内充满酸臭液体及气体,腺胃乳头有出血点,心包周围、肝表面覆盖一层黄色胶胨样物。十二指肠、小肠出血,肠系膜脱落、溃疡,盲肠扁桃体肿大出血。种鸽卵巢出血。
3实验室诊断
3.1样品处理
取脾和肺进行研磨,加人生理盐水制成20%的乳剂,反复冻融3次,于零下20度保存以备用。
3.2 RT-PCIZ
RT-PCR结果见图1。
RNA提取与反转录(RT)。取制备好的病料悬液,按RNA提取试剂盒说明书进行提取,得到的RNA模板立即用于反转录。反转录体系为25微升,RNA模板16微升,引物M1 2微升,5xBuffer5微升,dNTP 2微升,RNasin0.5微升,M-MLV0.5微升。置PCR仪中42℃反转录1小时,95℃5分钟,反应结束后直接使用或于零下70度保存。
PCR扩增。取反转录产物5.0微升加入到新城疫PCB反应A混合物的PCB管中,混匀,2000转/分钟离心10秒,立即进行PCR扩增;同时设阴阳性对照。扩增条件为94度4分钟,94度30秒,56度50秒,72度50秒,35个循环,72度延伸5分钟,4度保存。取反应A的反应物0.5微升加入到新城疫PCB反应B混合物的PCR管中,混匀,2000转/分钟离心10秒,立即进行PCR扩增;同时设阴阳性对照,扩增条件为94度4分钟,94度30秒,56度50秒,72度50秒,35个循环,72度延伸5分钟,4度保存。
琼脂糖凝胶电泳。取PCR产物5微升,于1%琼脂糖凝胶中电泳,凝胶牛含有13.5微升/毫升溴化乙锭,电泳缓冲液为0.5xTAE,80伏30分钟,电泳完后于紫外灯下观察拍照,有460bp的目的带出现。
3.3病毒分离鉴定
将3.1处理的样品,加入“双抗”(青霉素、链霉素)(2000单位/毫升),感作l小时,然后离心取上清液接种10日龄的SPF鸡胚2枚,37度孵育,接种后鸡胚分别在36小时和40小时死亡,收集尿囊液,做红细胞凝集试验(HA),红细胞出现凝集,HA效价为28和27。
用新城疫阳性血清做血凝抑制试验(HI),可抑制新城疫病毒对红细胞的凝集,抑制价是27。
由此证明此鸽群发生的为新城疫病。
4防治
鸽群紧急免疫新城疫Ⅵ系苗,种鸽4羽份/只,肉鸽3羽份/只进行滴鼻。
每天的饮水中加入0.05%的氟苯尼考和3%的葡萄糖供鸽子饮用,连用3天,增强鸽子的抵抗力,防止继发感染。
保持饲料和饮水的清洁卫生,保证鸽舍的通风干燥,加强鸽舍的保暖措施,彻底清除鸽舍内的粪便及污物,用消毒剂进行消毒。
3天后回访,除肉鸽紧急免疫后死亡8只外,其余的肉鸽、种鸽病情已得到控制,并恢复正常。
←浏览更多技术文章请点击左侧的导航条相关技术文章...
- 1.树芦荟治鸽病
- 2.鸽霍乱的治疗
- 3.鸽痘流行特点与防治法
- 4.鸽其他疾病防治技术:鸽体外寄生虫病
- 5.雌鸽子不下蛋的两种情况
- 6.鸽禽流感的诊断与防治
- 7.肉鸽鸽痘如何治疗
- 8.肉鸽软脚病的治疗
- 9.鸽子的体内寄生虫
- 10.乳鸽死残综合征如何防
- 11.一例鸽蛔虫病诊治
- 12.简易防治鸽常见病
- 13.鸽子得了传染性鼻炎该怎么治疗
- 14.鸽溃疡性肠炎
- 15.鸽其他疾病防治技术:鸽球虫病
- 16.肉鸽常见病简易防治
- 17.肉鸽霉菌性口炎的诊治
- 18.鸽副伤寒的诊断与防治
- 19.肉鸽胃肠炎防治
- 20.鸽生长时期的药物防病与疫苗免疫
更多案例...看看致富经验...
- 1.朱园园:办生态养鸽场,创
- 2.鸽王的致富经
- 3.生态养鸽效益好
- 4.“借”着乳鸽 脱贫致富
- 5.“借”着乳鸽 脱贫致富
- 6.养殖小乳鸽成为致富典型
- 7.发展乳鸽 脱贫致富
- 8.乳鸽养殖带动农民致富
- 9.养鸽创业:2000对种鸽年创
- 10.致富乳鸽 插上科技翅膀
- 11.鸽子飞上“摇钱树”
- 12.李尚龙:多种养殖走上致富
- 13.洞庭湖畔飞翔的“白鸽”
- 14.夏明光:养鸽致富带动乡邻
- 15.房忠岩:“鸽子王”的养鸽
- 16.农民工閣光爱:"养鸽
- 17.黔西县甘棠乡新田村养鸽专
- 18.养鸽,让峡口农民钱袋鼓起
- 19.养乳鸽走上了致富路
- 20.兴业:千余农民用QQ做生意
更多视频...相关技术视频...